病毒包装实验
病毒类型
病毒有很多种多样,普遍的有慢病毒和腺病毒。
基本原理:
慢病毒(Lentivirus)是逆转录病毒的一种。一方面可以增加取代瞬间表述载体应用,另一方面,复制通过慢病毒包装系统软件包装后,可用以感柒借助传统式转染实验试剂难以转染的细胞系如原代细胞、飘浮细胞和处在非瓦解情况的细胞,而且在感柒后可以融合到受感柒细胞的基因,开展长期的平稳表述。
慢病毒包装简略步骤:
1)带有目的基因的慢病毒 RNAi 影响载体的建立和质粒提纯获取。
2)慢病毒载体,包装系统软件共转染病毒包装细胞293T等。
3)塑造 48hrs - 72hrs 上下,搜集带有病毒的上清培养液。
4)病毒的提纯和提液。
5)散装、- 80 ℃储存。
6)滴度测量目的基因计量检定,并出示检验报告。
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